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| 现有的血小板保存方法均存在一定的局限性。冷冻干燥保存法具有保存时间长、保存条件要求简单、便于运输、复水后可以直接使用等优点,为血小板的长期稳定保存提供了一种潜在的理想方法。目前血小板的冷冻干燥保存技术研究己取得了令人鼓舞的进展,小容量(1～2mL)人血小板在冻干复水后能够达到较高的恢复率和活性指标,但是距离临床应用还有很大距离。本文以深入理解一次干燥过程、提高冷冻干燥血小板的容量为目标,开展了以下研究工作：(1)在6Pa真空度,-60℃预冻温度,预冻速率10KK/min,-30。C作为一次干燥温度的条件下,测量得到了干燥层的水蒸气扩散系数Dd=1.6589×10-Sm2/s。(2)使用COMSOL Multiphysics软件对小瓶内一次干燥过程进行了模拟计算,结果表明,血小板冻干保存液的一次干燥过程主要受传热控制,瓶子底部形状对一次干燥速率有较大影响,论文还研究了初始装液高度、搁板温度对一次干燥时间的影响。(3)实验研究了一次干燥温度位对血小板冻干的影响,得到了不同一次干燥温度下血小板冻干复水后的数值恢复率、血小板平均体积和血小板分布宽度等指标。结果表明,一次干燥温度为-30℃时,血小板冻干复水后的数值恢复率为89.0±4.8%；MPV和PDW值分别为12.4±1.4fL和18.3±1.4%,属于可以接受的范围之内；冻干样品外观完整饱满,无明显瑕疵；流式检测结果表明血小板细胞冻干复水后未凋亡率为87.47±2.57%,活化率为85.38±5.93%。(4)使用自制血小板保存盒进行了大容量(100mL)血小板冷冻干燥保存的初步实验研究,冻干血小板复水后的数值恢复率为66.3±2.1%,MPV为12.4±0.6fLPDW为18.00±0.7%,较对照组偏高；未凋亡率为77.75±6.31%,活化率为91.75±0.93%,血小板基本丧失了活性。聚集检测表明,聚集率约为新鲜血小板的50%。 |
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